Rozprzestrzenianie sie opornosci na artemizyne w malarii Plasmodium falciparum AD 4

Mierzono temperaturę ciała i hematokryt oraz rozmaz krwi w celu zliczenia pasożytów – po 0, 4, 6, 8 i 12 godzinach, a następnie co 6 godzin, aż do momentu, gdy dwa kolejne slajdy zostały uznane za ujemne. Oceny follow-up przeprowadzono w dniach 7 i 14 we wszystkich placówkach badawczych; Pacjenci byli obserwowani co tydzień przez 28 lub 42 dni w sześciu miejscach. W przypadku nawracających zakażeń przeprowadzono genotypowanie polimerazy z reakcją łańcuchową (PCR) przy użyciu msp1, msp2 i glurp jako markerów genetycznych w celu odróżnienia ponownego wystąpienia od nowo nabytej infekcji. W Kenii do genotypowania użyto tylko msp2.
Genetyczne markery oporności na artemisininę
Po amplifikacji PCR, pełną sekwencję kelch13 określono z izolatów P. falciparum uzyskanych przy przyjęciu (patrz Dodatek dodatkowy, dostępny w) .10
Mikroskopia Środki kontroli jakości
Kontrola jakości mikroskopu podczas całego badania zosta a przeprowadzona przez doświadczonych mikroskopistów w czterech z badanych miejsc. Wszystkie szkiełka uzyskane przy przyjęciu i po 72 godzinach ponownie sprawdzono. Kompletne zestawy szkiełek pacjenta zostały ponownie sprawdzone, jeśli standardowe odchylenie reszt w dopasowaniu do liniowego odcinka profilu pasożyt-czas (patrz poniżej) było większe niż 1, szacowana faza opóźnienia była dłuższa niż 12 godzin, szacowana wartość prześwitu została oparta na dwa dodatnie liczby lub ostatnia dodatnia liczba pasożytów była większa niż 1000 na milimetr sześcienny.
Wyniki badań
Pierwszorzędowym rezultatem był okres półtrwania w pasożytach, miara współczynnika klirensu pasożyta pochodzącego z odcinka liniowego krzywej logarytmiczno-czasowej pasożyta (okres półtrwania klirensu = loge2 podzielony przez współczynnik klirensu pasożytów) .18-20 Wtórne wyniki były proporcjami pacjentów z okresem półtrwania w fazie eliminacji pasożytó w trwającym dłużej niż 5 godzin, wykrytym w badaniu mikroskopowym w dniu 3 pasożytem21, gametocytemią po leczeniu, zapadalnością na anemię i skutecznością 6-dniowego schematu leczenia artesinianem oraz na podstawie artemisinin terapia skojarzona, skorygowana za pomocą genotypowania PCR.17
Analiza statystyczna
Obliczenia wielkości próby oparto na wskaźnikach klirensu pasożytów wśród 1952 pacjentów leczonych doustnie artesunatem w latach 2001-2010 w północno-zachodniej Tajlandii, 12, które miały logarytmiczny rozkład, przy średniej geometrycznej współczynników klirensu od 0,19 do 0,24 na godzinę i standardowej skali logarytmicznej odchylenia od 0,40 do 0,55 (współczynnik zmienności w pierwotnej skali, 43 do 49%). Na podstawie log-liniowego komponentu pasożyt-czas nachylenia, obliczyliśmy, że próbka 50 pacjentów na grupę w każdym miejscu zapewni 12, 15 i 17% precyzji i 80% mocy do wykrycia 20%, 25 % i 27% spadku średniej geometrycz nej współczynników klirensu pasożytów w zakresie od 0,17 do 0,30 na godzinę, przy założeniu wartości odchylenia standardowego wynoszącej odpowiednio 0,40, 0,50 i 0,55 [przypisy: odzywka do włosów, psychoterapia poznawczo behawioralna warszawa, okulary progresywne ceny ]